1. 蜜蜂肽(Apidaecins)概念?
Apidaecins是最早从受E.coli诱导的蜜蜂(Apis mellifera)淋巴液中发现的一类新型抗菌肽,包括3个精氨酸和6个脯氨酸残基,对革兰氏阴性菌有特异的抗菌功能,属于可诱导表达的抗菌肽。
2. 蜜蜂肽(Apidaecins)杀灭大肠杆菌实质?
Apidaecin通过与DnaK蛋白的基质结合位点结合,并通过与基质竞争该位点而降低DnaK蛋白在细胞内的实际浓度,从而抑制E.coli的β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶的活性,最终抑制细胞正常代谢而死。
具体过程如下:
(1)apidaecin以非特异方式与细胞的外膜组分(最有可能是LPS)结合;
(2) apidaecin肽进入细胞间质;
(3) 与位于细胞内膜上的一个受体/停靠分子 (最可能是细胞透性转运系统的组分) 以一种特异的、基本上不可以逆转的方式结合;
(4) apidaecin转运进入细胞内部;
(5) apidaecin与其作用的最终靶目标蛋白,最有可能是DnaK蛋白,结合而抑制DnaK蛋白的ATPase活性,使其丧失对错误折叠蛋白重新折叠的活性。
AP, apidaecin; LPS, lipopolysaccharide; DM, docking molecule or a receptor; OM, outer membrane; IM, inner membrane.
3. 蜜蜂肽(Apidaecins)安全性?
Apidaecin发挥作用完全缺乏成孔活性,它们通过立体特异性地作用于细菌蛋白而杀死细菌,杀菌过程非常迅速且不可逆,而且其对多种植物病原菌和人类致病菌均很强的杀伤作用。同时,由于原核生物和真核生物的DnaK分子的多螺旋盖区域的序列有明显的差异,Apidaecin不与人热应激蛋白HSP70(作用相当于细菌的DnaK蛋白)相结合,这就使这类昆虫抗菌肽具有很好的药用前景。
4. 蜜蜂肽(Apidaecins)对哺乳动物Caco-2细胞和罗非鱼上皮细胞安全性评价?
研究了三个浓度的Apidaecin (10μg/ml,20μg /ml和30μg /ml)对哺乳动物Caeo-2细胞(共养lh)和罗非鱼肠道上皮细胞(分别共培养24h和48h)生长形态、增殖、存活率、通透性、胞浆游离Ca2+和磷脂酶A2活性等相关指标的影响。研究结果表明:10-30μg/ml浓度范围内的Apidaecin体外对哺乳动物细胞和鱼的肠道细胞都没有显著影响(P>0.05)。